两路精神的精神内涵是一不怕苦、二不怕死；顽强拼搏、甘当路石；军民一家、民族团结。
2014年8月，在川藏公路、青藏公路（简称“两路”）建成通车60周年之际，习近平总书记作出重要批示，对修筑、养护“两路”时铸就的“两路”精神进行了高度概括和精确凝练：“一不怕苦、二不怕死，顽强拼搏、甘当路石，军民一家、民族团结”，要求进一步弘扬“两路”精神，助推西藏发展。2020年11月，习近平总书记对川藏铁路开工建设作出重要指示，强调发扬“两路”精神和青藏铁路精神，高质量推进工程建设。
一不怕苦、二不怕死，体现了忠诚事业、不畏艰险的英雄情怀。
“两路”精神形成于20世纪50年代修筑川藏、青藏公路的实践中，当时的历史条件和筑路环境有着苦和险的突出特征，筑路军民不怕艰苦、不畏艰险，完成了一个又一个“不可能完成的任务”。川藏公路沿线遍布高山峡谷、激流险滩和沼泽，地震滑坡、泥石流、雪崩等灾害频发，在这里筑路养路无比艰辛。青藏公路沿线的多座大山平均海拔在4000米以上，筑路军民时刻都面临着高寒、缺氧、辐射强、气候多变、多年冻土不化等恶劣的施工条件。外国探险家曾断言，从可可西里到唐古拉山口的数百里地带，是“死神主宰的地区”。号称“川藏公路第一险”的二郎山，阴面潮湿，时常下雨，山洪、塌方、泥石流时有发生。海拔5000多米的雀儿山，冬季气温极为寒冷，筑路官兵在吃饭时，往往一碗饭才吃到一半，另一半就冻成了冰疙瘩。怒江天险的悬崖峭壁长达数十公里，稍不留神就可能掉入湍急的江流之中。就是在这样的环境下，筑路军民硬是在“人类生命禁区”夺取了世界公路建设史上的惊人业绩。
在高原剧烈劳动，“两路人”心脏病患者剧增，不少人甚至献出了宝贵的生命。为征服二郎山天险，筑路大军以“铁打汉”和“坚如钢”的毅力一往无前。为了勘测到拉萨的线路，勘察队在原始森林里露宿，在山洞里冒着风寒过夜，翻越200多座大山，徒步行走10000多公里，历尽千难万险。在青藏公路修进昆仑山时，慕生忠将军对身边的同志说：“假如我死在青藏线上，就把我埋在这里！”他还在一个铁镐上刻上“慕生忠之墓”五个字。在他眼里，“人都免不了一死，但人生的死大致有三种，无非是老死、病死、战死。我不愿意躺在床上慢慢老死、病死，而愿意死在战斗的岗位上。”筑路艰辛，养路亦难！在川藏线雀儿山路段，被誉为“雪山铁人”的养路工陈德华立下誓言：“我就是死了，也要化成个路标，戳在这山上！”
顽强拼搏、甘当路石，体现了甘于吃苦、乐于奉献的高尚情操。
“两路”修筑之初，中国正处在一穷二白、积贫积弱的状态，尽管其间国家用于交通运输业的投资占全国投资总额的比例很高，但如何打通前往西藏的“天路”，仍是摆在全体筑路人面前的巨大难题。西藏距离内地遥远，既不通车，又不通航，筑路部队的供应陷入极端困难的境地，多次出现粮食不足、吃不饱饭的情况，有时只能靠挖野菜维持生命。在缺乏雨衣、大米和帐篷的日子里，“两路人”风餐露宿、爬冰卧雪，过着极端艰苦的生活。当时在世界屋脊修建“天路”，需要极高的技术水平和丰富的建设经验，但这两点恰恰受到历史条件的严重制约。施工部队在穿越高山峡谷时，往往连一张正确的地图都没有，不得不花更多的时间和精力来勘测，有时为寻找一条比较理想的路线，需要在崇山峻岭中跋涉10000多公里，翻越200多座雪山；由于多方面的科学知识几乎空白，也没有任何现成资料，施工队伍只能边干边摸索。施工工具也极为简陋，大量使用铁锤、铁锹、钢钎、镐头，有时甚至连这样简单的工具也缺乏。
康藏公路筑路政委穰明德说过，“把修好的路留给别人，把没有路的地方留给自己”，“两路人”把无私奉献的精神诠释得淋漓尽致。川藏公路跨过10多座有名的大山，打通每一座大山都要经历数不尽的磨难。有的战士集中精力挥动铁锤打炮眼，双手虎口被震裂却毫无觉察；有的战士手握钢钎时间太久，手和冰冷的钢钎冻在一起；有的战士得了雪盲，眼睛红肿得睁不开也不肯休息，硬是要坚持上工……第53师指战员喊出“让高山低头，叫河水让路”的口号，在党的八大二次会议上得到毛泽东同志的充分肯定，成为鼓舞全国人民闯关夺隘的强大精神动力。
军民一家、民族团结，是我们不断从胜利走向胜利的重要法宝。
10多万筑路大军里，既有军人也有民众，各民族在“两路”上携手铸就了不朽功绩，共同创造了“两路”精神，书写了军民团结、民族团结的重要篇章。习近平总书记强调，“全党全军全国各族人民要大力弘扬军爱民、民拥军的光荣传统，不断发展坚如磐石的军政军民关系”“铸牢中华民族共同体意识，加强各民族交往交流交融，促进各民族像石榴籽一样紧紧抱在一起，共同团结奋斗、共同繁荣发展”。传承“军民一家、民族团结”的“两路”精神，就要坚持军民团结一条心、中华民族一家亲，汇聚起全面建设社会主义现代化国家、实现中华民族伟大复兴的磅礴伟力。
“两路”的修筑和养护史，就是汉藏等各民族军民的团结奋斗史。党中央一开始就严格要求进藏部队以人民群众的利益为主，始终做到“不吃地方”和“决不侵扰老百姓”。毛泽东同志还手书了“为了帮助各兄弟民族，不怕困难，努力筑路”，送给十八军。施工部队反复学习和严格遵守民族政策文件，赢得了各民族同胞的信任与支持。解放军进藏后，坚决贯彻执行党的民族政策和宗教政策，充分尊重各地风俗习惯和各民族同胞，平等对待每一位农牧民，让他们深切感到换了人间。解放军不仅帮助各民族同胞筑路，还长期开展“送科技、送教育、送文化、送法律、送健康”爱民助民活动，带动当地经济社会发展。西藏人民把“两路”称为“幸福路”“金桥”“彩虹”，他们动情地说：“解放军带来的好处，就像春天草原上长出来的草一样多。”在修筑“两路”的丰碑上，藏族等各民族人民也作出了巨大贡献。他们与解放军一起施工，打破民族内部的封建阻隔，在泥沼冰河、陡坡悬崖、风雪深山中披星戴月、夜以继日地奔走，给筑路工地源源不断运送各种物资。
“军民一家、民族团结”的精神，引领一代又一代“两路人”成功修筑和养护了川藏、青藏公路，道路的修通和改善又进一步加深了汉族、藏族和其他各族人民的交往联系，从根本上促进了军民团结和民族团结。